Objetivo : O objetivo do estudo foi determinar se células não invasivas e prontamente disponíveis poderiam ser usadas para o diagnóstico rápido de anormalidade cromossômica específica para facilitar o manejo de pacientes em situação aguda / especializada.
Métodos : No presente estudo, analisamos células sanguíneas, bucais e de urina de 3 pacientes com trissomia 21 com sondas específicas de locus para o cromossomo 21. Três indivíduos normais foram incluídos para comparação. Os casos clínicos foram confirmados com estudos citogenéticos convencionais de linfócitos periféricos antes da inclusão no estudo.
ResultadoAs freqüências médias de 1, 2 e 3 sinais de hibridização foram de 2,2%, 6% e 91% para células sangüíneas, 2,5%, 7% e 89,8% para células bucais e 2%, 9,3% e 87,4% para células urinárias, respectivamente os casos. Células trissômicas falsas foram menos de 1% em todos os tipos de células nos controles. Células monossômicas falsas foram de 3,6%, 4,5% e 9,8% para sangue, bucal e urina em controles que foi bastante semelhante às sondas FISH de fenoide (cromossomo 1 e 18).
Conclusão : Este estudo sugere que sondas FISH específicas para locus de DNA podem ser usadas em células sanguíneas / bucais / urinárias para diagnóstico rápido não invasivo, mas devido a altas taxas de monossomia falsa, pode não ser preciso diagnosticar baixo nível (<10%) de mosaicismo . O teste é adequado para situações médicas urgentes para orientação de gerenciamento.
Palavras-chave
células sanguíneas, células bucais, células da urina, interfase não invasiva rápida FISH
Como citar este artigo:
HALDER A, FAUZDAR A. UTILIZAÇÃO POTENCIAL DE CÉLULAS SANGUÍNEA, BUCAL E URINA PARA DIAGNÓSTICO NÃO INVASIVO RÁPIDO DE ANEUPLOIDIA SUSPEITADA UTILIZANDO FLUORESCÊNCIA NA HIBRIDIZAÇÃO SITU (FISH). Jornal de Pesquisa Clínica e Diagnóstica [serial online] 2007 abril [citado: 2018 16 de agosto]; 1: 33-38. Disponível em
http://www.jcdr.net/back_issues.asp?issn=0973-709x&year=2007&month=April&volume=1&issue=2&page=33-38&id=51
A anormalidade cromossômica é a principal causa de perda reprodutiva, malformação congênita, retardo mental e câncer. A citogenética é indicada para diagnosticar uma síndrome cromossômica suspeita conhecida, retardo psicomotor inexplicável, anomalia no desenvolvimento sexual, infertilidade, dismorfismo, câncer, perda recorrente de gravidez e gravidez em risco de aneuploidia. A análise citogenética por técnicas convencionais de bandas cromossómicas, embora seja um método padrão importante, requer cultura de células, pessoal qualificado e trabalho intensivo e demorado. A interfase FISH expandiu as possibilidades de diagnóstico preciso e rápido em genética clínica, incluindo câncer (1) , (2) . Esta abordagem foi testada em células do sangue periférico (3) , (4)esfregaços bucais (3) - (8) esfregaços de urina (9) , (10) e esfregaços cervicais (11) , (12). A justificativa para o uso de tais esfregaços é que eles são não-invasivos, rápidos e diretos, ou seja, a cultura de tecido é eliminada. Eles são importantes em situações como recém-nascidos gravemente doentes com uma suspeita de aneuploidia ou suspeita de síndrome de microdeleção que requer terapia intensiva e recém-nascidos com genitália ambígua, exigindo sexo rápido para o tratamento, bem como para a razão social. A análise cromossómica pelo método convencional é impossível em células diferenciadas terminalmente não divididas, nomeadamente, células bucais, células da urina, etc, ou pode ser difícil de executar em doentes gravemente doentes, em particular em recém-nascidos gravemente doentes, onde a amostragem de sangue venoso é difícil. Com a técnica de FISH, é possível identificar o número de cromossomos específicos em células em interfase em quase todos os tipos de tecidos, incluindo células bucais, células da urina ou células do sangue do pênis do calcanhar. Além disso, células bucais, células de urina ou hemácias representam células ectodérmicas (células bucais), endodérmicas (células de urina) e mesodérmicas (células do sangue). Além disso, um grande número de células em interfase (aproximadamente algumas centenas) pode ser avaliado em curto período de tempo com FISH em interfase ma gravidez. Portanto, essa abordagem é o método mais apropriado para o estudo do mosaicismo. No entanto, o uso de esfregaços diretos é freqüentemente associado à hibridização deficiente devido a dificuldades na acessibilidade de sondas e fragmentos associados. O presente estudo destina-se a superar as dificuldades acima e, ao mesmo tempo, manter todos os benefícios dos esfregaços com as mais difíceis sondas FISH específicas de locus. A utilidade e o potencial são explorados e discutidos. células de urina ou hemácias representam células ectodérmicas (células bucais), endodérmicas (células de urina) e mesodérmicas (células do sangue). Além disso, um grande número de células em interfase (aproximadamente algumas centenas) pode ser avaliado em curto período de tempo com FISH em interfase. Portanto, essa abordagem é o método mais apropriado para o estudo do mosaicismo. No entanto, o uso de esfregaços diretos é freqüentemente associado à hibridização deficiente devido a dificuldades na acessibilidade de sondas e fragmentos associados. O presente estudo destina-se a superar as dificuldades acima e, ao mesmo tempo, manter todos os benefícios dos esfregaços com as mais difíceis sondas FISH específicas de locus